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Aalaa E. Eldessoky 1 1 ^(1){ }^{1} ， Mohammed M. Khalefa 1 1 ^(1){ }^{1} 和 Ashraf M. Abu-Seid22* 2 2 ^(2){ }^{2} （c）

抽象


目的 比较二极管激光 （DL） 980 nm 和双抗生素糊剂 （DAP） 对犬模型坏死牙髓和根尖周炎成熟牙齿对再生牙髓治疗反应的影响。方法 诱导 4 只 2 岁犬的 40 颗成熟双根前磨牙髓坏死和根尖周病变。根据消毒方案将这些牙齿随机分为 4 组（每组 10 颗牙齿/20 个牙根），第 I 组：DAP;第 II 组：DL980 nm;第 III 组：阳性对照（未治疗）和第 IV 组：阴性对照（未触及的牙齿）。根据评价期将这些组进一步细分为 2 个亚组 （每组 5 颗牙齿/10 个牙根），亚组 （A）：1 个月，亚组 （B）：3 个月。使用出血诱导和应用富血小板纤维蛋白 （PRF） 进行血运重建技术。冠状腔用三氧化二矿物骨料 （MTA） 和玻璃离子水泥密封。评估炎症反应、生长中的重要组织、新的硬组织形成和骨吸收。使用 ANOVA、Tukey 事后和配对 t t tt 检验进行统计分析。结果 在两个亚组中，DAP 和 DL980 在炎症细胞计数、重要组织生长、新硬组织形成和骨吸收方面无显著差异 （ P ≤ 0.05 P ≤ 0.05 P <= 0.05\mathrm{P} \leq 0.05 ）。结论 二极管激光器 980 nm 可以作为成熟坏死牙齿 RET 期间根管消毒的交替 DAP 方法，因此它可以加速患者和牙医的再生牙髓治疗，并允许在一次预约中进行 RET。

关键词 二极管激光，双重抗生素膏，根尖周病变，再生牙髓，血运重建。

背景


如今，再生牙髓疗法 （RET） 在牙髓疾病的治疗中发挥着至关重要且有前途的作用，因为牙髓复合细胞能够将受损组织再生为健康的重要组织 [1]。首先，评估 RET 对牙髓坏死的未成熟牙齿的治疗 [2-9]。

最近，RET 在成熟牙齿中显示出有希望的结果 [10， 11]。牙髓再生不是由人工充填材料制成的机械密封，而是提供生物密封并增加根管根尖部分的抗断裂性 [2]。

根管治疗 （RCT） 过程中牙髓组织不可逆的损失有许多缺点，例如缺乏感觉、牙冠变色和免疫机制、牙齿半透明层的变化和牙根断裂的高度敏感性。此外，RCT 对患者和牙科医生来说都是一个漫长而昂贵的过程 [10]。

成熟牙齿的再生牙髓治疗可以克服这些缺点，用新形成的组织对根管进行“生物填塞”，从而重新建立感觉和免疫机制。这可能会降低急性发作的发生率，并且可能比传统方法更耐骨折 [10]。

有效的根管消毒是 RET 的必要条件 [8， 10]。传统的根管消毒方法包括次氯酸钠、机械制剂和氢氧化钙，但在生物膜相关感染的情况下效率低下 [12]。因此，建议将其他根管内药物作为根管消毒的替代或补充，例如三重抗生素糊剂 （TAP）。

对于未成熟坏死牙髓的牙齿和成熟坏死牙髓的牙齿，RET 的主要区别在于，由于牙本质根壁非常薄和脆弱，限制了完整的机械准备。因此，未成熟牙齿的消毒是通过大量的冲洗和根内药物来完成的。完全机械清创术对于消除根管感染和去除坏死组织至关重要 [10]。

由于 TAP 中的药物之一米诺环素会导致年轻、成熟的牙齿变黑，这是其主要缺点之一，因此建议使用双重抗生素糊剂 （DAP） [12， 13]。较高剂量的 DAP 具有相当大的抗菌作用，但对干细胞活力有不利影响 [13]。

手术技术。对于牙科应用，激光波长通常在 800 到 1 之间 ， 064 nm 1 ， 064 nm 1,064nm1,064 \mathrm{~nm} [16]。最近的一项研究推荐使用半导体激光，该研究评估了其在牙髓坏死的未成熟牙齿成熟发育中的疗效 [17]。然而，当二极管激光器用于成熟牙齿 RET 的根管消毒时，很少有研究可用。因此，本研究比较了二极管激光 980 nm 和 DAP 对犬模型中牙髓坏死和根尖牙周炎成熟牙齿对再生牙髓治疗反应的影响。

材料和方法

伦理认证


埃及爱资哈尔大学女子牙科医学院研究伦理委员会批准了这项研究 （P-EN-21-03）。此外，所有动物研究：体内实验报告 （ARRIVE） 指南都得到了跟进。我们尽一切努力减轻动物的痛苦。所有实验均按照相关指南和规定进行。

动物模型

四只 2 岁的犬是从 AlFahad Trading Company for Animals（埃及吉萨阿布拉瓦什）购买的，并用于本研究。所有的狗都有一整套恒牙。这些狗被饲养在埃及开罗大学兽医学院外科系的独立笼子里，具有最佳的通风、温度、卫生标准、营养膳食和 12 小时的光照/黑暗循环。狗吃了两顿翘起的食物（ 20 g / kg 20 g / kg 20g//kg20 \mathrm{~g} / \mathrm{kg}
四只 2 岁的犬是从 AlFahad Trading Company for Animals（埃及吉萨阿布拉瓦什）购买的，并用于本研究。所有的狗都有一整套恒牙。这些狗被饲养在埃及开罗大学兽医学院外科系的独立笼子里，具有最佳的通风、温度、卫生标准、营养膳食和 12 小时的光照/黑暗循环。这些狗随意吃了两顿翘起的食物 （ 20 g / kg 20 g / kg 20g//kg20 \mathrm{~g} / \mathrm{kg} ） 和牛奶以及淡水。在每只狗中，选择了 10 颗前磨牙，总和 40 颗牙齿构成了 80 个根管。这些牙齿被随机分为四个主要组 （每组 10 颗牙齿/20 个牙根）。每只狗都有所有组的代表。右侧包括阳性对照和激光组，左侧包括阴性对照和 DAP 组。

样本量计算


样本量计算使用 SPSS ⊖ ⊖ ^(⊖)^{\ominus} Sample Power ⊖ ⊖ ^(⊖){ }^{\ominus} Release 3.0.1 的 alpha （ ） 水平 0.05 （功效 = 80 % = 80 % =80%=80 \% ） IBM ∙ IBM ∙ IBM^(∙)\mathrm{IBM}^{\bullet} 完成。 α α alpha\alpha 使用 CDC Epi Info 程序版本 7.2.0.1（美国亚特兰大）估计计算。根据使用 DL 的实验组与 0.552 ± 0.097 0.552 ± 0.097 0.552+-0.0970.552 \pm 0.097 使用 DAP 的实验组相比的估计平均细菌计数 1.712 ± 0.848 1.712 ± 0.848 1.712+-0.8481.712 \pm 0.848 ，需要来自两只狗（每个实验组 10 颗，对照组 8 颗）的至少 28 颗牙齿的总样本 [17]。

诱导根尖周围病变


这些狗在禁食 12 小时后接受了全身麻醉。硫酸阿托品 （Atropine sulphate 1 % ∘ 1 % ∘ 1%^(@)1 \%{ }^{\circ} ， ADWIA， Egypt） 和盐酸甲苯噻嗪 （Xylaject 2 % ∘ 2 % ∘ 2%^(@)2 \%^{\circ} ， ADWIA， Egypt） 分别作为术前用药皮下和肌肉注射给药。盐酸氯胺酮 （盐酸氯胺酮 ⊕ ⊕ ^(o+){ }^{\oplus} ，Rotexmedica Co.，德国） 通过头静脉中的套管以体重剂量静脉 5 mg / kg 5 mg / kg 5mg//kg5 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} 内给药以诱导麻醉。通过以体重剂量静脉注射 2.5% 硫喷妥钠 （Thi喷thal钠 ∘ ∘ ^(@){ }^{\circ} EIPICO） 维持全身麻醉。 25 mg / kg 25 mg / kg 25mg//kg25 \mathrm{mg} / \mathrm{kg}

在所有实验和阳性对照牙齿中进行冠状腔检测。暴露髓室是使用 #2 金刚石制成的，高速手机安装在便携式装置上。使用无菌锉刀 #15 来破坏牙髓。将狗的龈上斑块悬浮在无菌盐水溶液中，并在放入牙髓室之前将无菌海绵浸入悬浮液中。将一块棉花插入每个根管的开口后，冠状腔用棉花填充一个月。对于术后镇痛，狗口服软食和卡洛芬片剂 （Rimadyl 片剂 ⊖ ⊖ ^(⊖){ }^{\ominus} ，Zoetis，美国） 10 天，剂量为 4.4 mg / kg 4.4 mg / kg 4.4mg//kg4.4 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} 每日一次 [5-8]。

双重抗生素糊剂的制备


将等量的环丙沙星（Ciprocin 250 mg Capsule，EIPICO，埃及）和甲硝唑（Flagyl 250 mg Tab，赛诺菲安万特，埃及）与蒸馏水混合，以产生稀释浓度的 DAP ( 0.1 mg / mL ) ( 0.1 mg / mL ) (0.1mg//mL)(0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) 。 ⊖ ⊖ ^(⊖){ }^{\ominus} 在磁力搅拌下，将 2.5 g 甲基纤维素粉末与 100 mL DAP 混合，以产生用于此目的的均质凝胶。

根管准备和消毒


程序。使用顶点定位器，计算 REP （E-CONNECT， E-PEX Pro， Eighteeth， China） 到解剖顶点的工作长度。使用 ProTaper Universal 系统（Dentsply Maillefer，Ballaigues，瑞士），将根管管器械加工至所需长度，最长可达 #F4。在制备的所有阶段，使用 2 号侧通风针头将 2 mL 1.5 % 1.5 % 1.5%1.5 \% 次氯酸钠 （NaOCl）（Clorox Co.，埃及）灌溉到每个根管中锉刀之间。用 0.9 % 0.9 % 0.9%0.9 \% 生理盐水 （ 20 mL / 20 mL / 20mL//20 \mathrm{~mL} / 根管，5 分钟） 最后一次冲洗后，用纸尖干燥 I 组根管并用 DAP 包扎。使用 20 号无菌塑料注射器通过根管注射 DAP 混合物。通路腔暂时填充玻璃离子聚合物（Riva Self Cure，SDI Limited，澳大利亚）。
另一方面，II 组在半导体激光消毒前进行了机械准备。为了进行激光治疗，首先在根管中填充 2 mL 的 1.5 % 1.5 % 1.5%1.5 \%次氯酸钠。激光光纤 （ 980 nm , 2.5 w 980 nm , 2.5 w 980nm,2.5w980 \mathrm{~nm}, 2.5 \mathrm{w}
应用玻璃离子修复以填充冠状腔。

疗法


在第 I 组中，根据 AAE 指南，用蒸馏水大量冲洗，然后用 6 mL 1.5 % NaOCl 1.5 % NaOCl 1.5%NaOCl1.5 \% \mathrm{NaOCl} 溶液和 17 % 17 % 17%17 \% EDTA 溶液（Prevest Denpro，Digiana，查谟，印度）（ 5 mL / 5 mL / 5mL//5 \mathrm{~mL} / 管，5 分钟）去除 DAP，根据 AAE 指南对未成熟牙齿进行 RET 冲洗方案 [10， 12]。在两次灌溉之间使用具有纸点干燥度的蒸馏水。

第 II 组用 2 mL NaOCl 1.5 % 1.5 % 1.5%1.5 \% 溶液冲洗根管，然后用 980 nm 二极管激光器以 1.5 W 的功率激活，Ton=10 毫秒;T 关闭 = 10 mil − = 10 mil − =10mil-=10 \mathrm{mil}- 线性 50 Hz（50% 脉冲模式）。将直径为 200 微米的光纤尖端插入比其工作长度短 1 毫米的根管中，并以每秒 2 毫米的速度绕根壁螺旋移动。在灌溉之间使用纸点干燥的蒸馏水。用 17 % 17 % 17%17 \% EDTA 溶液冲洗和激光照射，然后再次进行
  1. *通信地址：Ashraf M. Abu-Seida

    ashrafseida@cu.edu.eg;ashrafseida@yahoo.com
    1 1 ^(1){ }^{1}埃及开罗爱资哈尔大学女子牙科医学院牙髓病学系
    2 2 ^(2){ }^{2}开罗大学兽医学院外科、麻醉学和放射学系，PO：12211，吉萨，埃及